DOI: 10.29166/odontologia.vol22.n2.2020-33-44
URL: http://revistadigital.uce.edu.ec/index.php/odontologia/article/view/2383

Artículos científico

Actividad antimicrobiana de adhesivo ortodóntico con nanopartículas de plata sobre Streptococcus mutans

Antimicrobial activity of orthodontic adhesive with silver nanoparticles on Mutans streptococci

Atividade antimicrobiana de adesivo ortodôntico com nanopartículas de prata sobre Streptococcus mutans


Luis Martin Guevara Ruiz1; Pablo Mauricio Bonilla Valladares2; María Fernanda Caicedo Breedy3

RECIBIDO: 07/08/2019 ACEPTADO: 05/05/2020 PUBLICADO: 01/07/2020

  1. Graduado de la Carrera de Odontología de la Universidad Central del Ecuador. Quito – Ecuador.
  2. Bioquímica Farmacéutica, Universidad Central del Ecuador. Master en Educación Superior y Administración Educativa. Universidad Indoamérica. Docen-te de la Carrera de Odontología de la Universidad Central del Ecuador.
  3. Químico, Universidad Central del Ecuador. Master en Nanociencia y Nanotecnología, Universidad de Barcelona, Docente de la Carrera de Química de la Universidad Central del Ecuador (UCE) – Quito.

CORRESPONDENCIA

María Fernanda Caicedo Breedy

Facultad de Odontología, Universidad Central del Ecuador. Av. América y Universitaria s/n. 5932231788. Quito, Ecuador

fcaicedo@uce.edu.ec

RESUMEN

La aparatología fija usada en ortodoncia dificulta una adecuada higiene bucal, en estas condiciones el desarrollo de lesiones cariosas puede ser una complicación, uno de los principales agentes etiológicos involucrados es Streptococcus mutans. La nanotecnología con plata tiene una aplicación preventiva importante en biomateriales dentales. Objetivo: Se determinó la actividad antimicrobiana sobre Streptococcus mutans de nanopartículas de plata (AgNPs) incluidas en adhesivos ortodónticos a diferentes concentraciones. Materiales y métodos: En 20 cajas Petri con Streptococcus mutans inoculada en agar Müller-Hinton suplementado con 5% de sangre, se colocaron 6 discos de papel, 4 embe-bidos con AgNPs incluidas en un adhesivo ortodóntico a concentraciones de 25, 75, 125 y 175 ppm, y 2 discos controles con clorhexidina al 0.12% y agua destilada. Se determinó la capacidad antimicrobiana en función de promedios de halos de inhibición a las 48 horas de incubación, en comparación con la escala de Duraffourd y la clorhexidina 0.12%. Resultados: A 25 ppm no existió capacidad antibacteriana, a 75 ppm el 50% alcanzó sensibilidad límite, pero el 100% de las muestras a 125 y 175 ppm consiguieron sensibilidad límite, sin embargo, la clorhexidina al 0,12% presentó mayor sensibilidad entre media 60% y sumamente sensible 40%. Conclusión: Las nanopartículas de plata con tamaño inferior a 100 nm, incluidas a 125 y 175 ppm en adhesivos de ortodoncia poseen actividad antimicrobiana sobre Streptococcus mutans, sin embargo, en el tiempo de estudio no alcanzan la sensibilidad de la clorhexidina al 0.12%.

Palabras clave: Nanopartículas, pruebas antimicrobianas de difusión por disco, Streptococcus mutans, microbiología, ortodoncia, técnicas in vitro.


ABSTRACT

The fixed appliances used in orthodontics make proper oral hygiene difficult, in these conditions the development of carious lesions can be a complication, one of the main etiologic agents involved is Mutans streptococci. It was determined that silver nanotechnology has an important preventive application in dental biomaterials. Objective: Antimicrobial activity on Mutans streptococci of silver nanoparticles (AgNPs) included in orthodontic adhesives at different concentrations. Materials and methods: In 20 Petri dishes with Mutans streptococci inoculated in Müller-Hinton agar supplemented with 5% blood, 6 paper discs were placed, 4 soaked up with AgNPs included in an orthodontic adhesive at concentrations of 25, 75, 125 and 175 ppm, and 2 control discs with 0.12% chlorhexidine and distilled water. Antimicrobial capacity was determined based on averages of inhibition halos at 48 hours of incubation, compared to the Duraffourd scale and 0.12% chlorhexidine. Results: At 25 ppm there was no antibacterial capacity, at 75 ppm 50% reached limit sensitivity, but 100% of the samples at 125 and 175 ppm achieved limit sensitivity, however, chlorhexidine 0.12% showed higher sensitivity between average 60% and highly sensitive 40%. Conclusión: Silver nanoparticles smaller than 100 nm, included at 125 and 175 ppm in orthodontic adhessives, have antimicrobial activity on Strptococcus mutans, however, when studying, they don’t reach the sensitivity of chlorhexidine at 0.12%.

Keywords: Nanoparticles, antimicrobial disc diffusion tests, mutans streptococci, microbiology, orthodontics, in vitro techniques.


RESUMO

Os aparelhos fixos utilizados em ortodontia dificultam uma higiene bucal adequada, nessas condições o desenvolvimento de lesões cariosas pode ser uma complicação, um dos principais agentes etiológicos envolvidos é o Streptococcus mutans. A nanotecnologia com partículas de prata tem uma importante aplicação preventiva em biomateriais dentários. Objetivo: Determinou-se a atividade antimicrobiana das nanopartículas de prata (AgNPs) incluídas em adesivos ortodônticos em diferentes concentrações sobre Streptococcus mutans. Materiais e métodos: Em 20 placas de Petri com Streptococcus mutans inoculadas em ágar Müller-Hinton suplementado com 5% do sangue, foram colocados 6 discos de papel, 4 ensopados com AgNPs incluídos em um adesivo ortodôntico nas concentrações de 25, 75, 125 e 175 ppm e 2 discos de controle com 0,12% de clorexidina e água destilada. O efeito antimicrobiano foi determinado com base nas médias de halos de inibição às 48 horas de incubação, em comparação com a escala de Duraffourd e com clorexidina a 0,12%. Resultados: A 25 ppm não havia capacidade antibacteriana, a 75 ppm 50% atingiram a sensibilidade limite, mas 100% das amostras a 125 e 175 ppm atingiram a sensibilidade limite, no entanto, 0,12% de clorexidina apresentou maior sensibilidade entre 60% em média e 40% altamente sensíveis. Conclusão: Nanopartículas de prata menores que 100 nm, incluídas em 125 e 175 ppm em adesivos ortodônticos, têm atividade antimicrobiana em Streptococcus mutans, no entanto, no tempo

Palavras-chave: Nanopartículas, testes de sensibilidade a antimicrobianos por disco-difusão, streptococcus mutans, microbiologia, ortodontia, técnicas in vitro.

INTRODUCCIÓN

La caries dental es una patología que progresa en forma crónica ante la falta de control de los factores que la producen. Streptococcus mutans es uno de los principales agentes etiológicos, estas bacterias cuentan con estructuras filamentosas largas en su superficie, que permiten adherirse y persistir en biopelículas donde se originan ácidos que generan desmineralización del esmalte debido a la alteración del pH, la capacidad buffer y el flujo salival, dando como resultado lesiones cariosas o manchas blancas, principal complicación que aparece tras el uso conti-nuo de aparatología fija durante el tratamiento de ortodoncia1-3.

El uso de aparatología en ortodoncia es un factor que predispone las lesiones cariosas debido a que es un factor de acumulación del biofilm, la mancha blanca se asocia con el tratamiento de ortodoncia cuando la higiene oral es deficiente; adicionalmente, los sistemas adhesivos de apa-ratos de ortodoncia fijos aumentan la capacidad de retención de placa y la potencial desmine-ralización, por ello es relevante investigar opciones que permitan su prevención y control4-6.

Además de una mayor incidencia de caries, con aparatología fija se evidencia una reacción inflamatoria de los tejidos gingivales, cuando la acumulación de la placa bacteriana alrededor de la aparatología adherida sobre la superficie de los dientes se acompaña con una higiene bucal deficiente4,7. El tratamiento ortodóntico produce cambios en el medio oral debido al aumento del número de superficies retentivas para la biopelícula incrementando los niveles de Streptococcus mutans8.

La nanotecnología abarca el estudio, síntesis y operación de materiales a escalas moleculares, de los llamados nanomateriales9. La bionanotecnología estudia los efectos e interacciones entre los materiales nanoestructurados y los sistemas biológicos. La investigación en el campo de nanomateriales dentales ha permitido nuevos avances orientados a preservar y mejorar la salud dental, ha tomado relevancia el concepto de “nanodentística” como la ciencia y tecnología del uso de materiales nanoestructurados en el diagnóstico, prevención y tratamiento de patologías orales como caries, enfermedad periodontal, maloclusiones, lesiones en tejidos blandos6,10,11.

La funcionalidad de las AgNPs se debe a que la forma, tamaño, estado de aglomeración, área y carga superficial, aumenta su solubilidad lo que favorece una mejor difusión, distribución, absorción y disponibilidad; se han atribuido muchos beneficios en medicina, principalmente en el control de enfermedades infecciosas. El uso de AgNPs en diferentes materiales de uso odontológico es muy funcional por la baja probabilidad de desarrollar resistencia bacteriana y alta eficacia contra biofilms, pueden atacar múltiples sitios dentro de la célula en una concen-tración muy baja (0,5 - 1,0%), alterando la permeabilidad y funciones respiratorias de la célula. Algunos estudios demuestran su efectividad para detener el avance de la caries y enfermedad periodontal, también pueden ser utilizados en soluciones acuosas irrigantes para tratamiento de conductos, como partículas de nanorrelleno para materiales de obturación, adhesivos y composites, en el revestimiento implantes de titanio y en formulaciones medicamentosas inclusive enjuagues bucales12-14.

Para evaluar la actividad antimicrobiana de AgNPs, es necesario garantizar su estabilidad como agentes biocompatibles y sus efectos biológicos a través de procesos de biofuncionalización15. La síntesis requiere un control del tamaño y forma para obtener un grupo de partículas libres con propiedades determinadas. Es común que la síntesis en disolución se realice mediante el empleo de un precursor metálico (AgNO3), un agente reductor (NaBH4 o Ac Ascórbico) y un estabilizante (CTAB Bromuro de cetil trimetil amonio)16,17.

El experimento evaluó la actividad antimicrobiana de discos embebidos con AgNPs en adhesivos ortodónticos a diferentes concentraciones sobre Streptococcus mutans, mediante la medición de halos de inhibición, en base a la escala de sensibilidad a antimicrobianos de Duraf-fourd.

 

Materiales y metodos

Estudio experimental in vitro; se prepararon soluciones de AgNPs de tamaño inferior a 100 nm en concentraciones de 25, 75, 125 y 175 ppm, diluidas en un adhesivo de ortodoncia, las dilu-ciones se embebieron en discos y se evaluaron sobre una población infinita de bacterias de Streptococcus mutans ATCC 25175.

Previo al experimento, se sintetizó y preparó soluciones de AgNPs en el laboratorio de Nanoestructuras de la Facultad de Ciencias Químicas de la UCE, mediante el uso de nitrato de plata y colágeno en solución, además de NaBH4. Las nanopartículas se caracterizaron con la técnica de análisis de diámetro hidrodinámico de partículas muy pequeñas, mediante la dispersión de luz dinámica “Dynamic Light Scattering” (DLS Horiba Nano Particle Analyzer SZ – 100); el tamaño, forma y tipo de las AgNPs, se determinó por Microscopía de Fuerza Atómica (Park Systems AFM NX10). Basados en los criterios de inclusión, las AgNPs inferiores a 100 nm fueron añadidas en las concentraciones de estudio al adhesivo de ortodoncia (Transbond® XT, 3M. Siguiendo el mismo procedimiento para concentraciones a 25, 75 y 125 ppm, para 175 ppm se usaron los siguientes parámetros:

1,5 mL x 0,01 m.mol / mL = 0,015 m.mol ------> 4,5 mL = 0,0033 M Ag
0, 0033 M Ag x 107, 8682 g/ mol x 1000mg / g = 359, 56 mg / L = ppm Ag Sol madre
4,87 mL + 0,13 mL agua tipo 1 = 5 mL ---> 350 ppm
1 mL Sol + 1 mL adhesivo = 2 mL / 0,350 mg Ag x 1000 mL = 175 ppm


Para la activación de la bacteria se empleó la cepa de Streptococcus mutans ATCC 25175, en una cámara de flujo laminar, siguiendo las instrucciones del fabricante se inoculó con un asa en tubos de ensayo estériles con 2 ml de caldo BHI (Brain Heart Infusion), incubando hasta que el crecimiento en el caldo sea equivalente a una turbidez de 0,5 en la escala de Mc Farland, equivalente a 1 x 108 unidades formadoras de colonias por mililitro.

Posteriormente, se inoculó el microorganismo en 20 cajas Petri con agar Müller-Hinton suplementado con 5% de sangre. En cada caja se colocaron 6 discos de papel embebidos respectivamente con las soluciones de AgNPs en el adhesivo ortodóntico a 25, 75, 125 y 175 ppm, clorhexidina al 0.12% y agua destilada. Las 20 cajas se incubaron en condiciones de anaerobiosis a temperatura de 37°C durante 48 horas. El efecto inhibitorio se determinó por medición de los halos de inhibición mediante una regla milimetrada (Calibrador Microbial Sensitivity, MSD - Merck Sharp & Dohme).

Con los halos de inhibición generados se realizó una base de datos y se comparó los porcenta-jes de longitud de halos basada en las tablas de actividad antimicrobiana de Duraffourd, que establece el diámetro del halo de inhibición de crecimiento bacteriano y lo ubica dentro de los siguientes parámetros: Nula: (-) inferior o igual a 8 mm; Sensibilidad límite: = (+) de 9 a 14 mm; Sensibilidad media: = (++) de 15 a 19 mm; Sumamente sensible: = (+++) igual o superior a 20 mm18.

 

Resultados

Los resultados de los halos de inhibición producidos con cada concentración de AgNPs, de-mostró que en la valoración cualitativa de sensibilidad evidencia que el 100% de las muestras a 25 ppm tiene actividad| nula sobre Streptococcus mutans; a 75 ppm el 50% (10;20) muestra sensibilidad límite; las muestras a 125 ppm y 175 ppm, tienen poder antibacteriano con sensibi-lidad límite en el 100% (20;20); la Clorhexidina al 0,12% existe el 60% (12;20) con sensibili-dad media y 40% (8;20) sumamente sensible. tabla 1. figura 1.

Tabla 1. Sensibilidad de las sustancias; Sensitivity of substances

Fuente: Base de datos de la Investigación
Elaborado: Los autores


Figura 1. Sensibilidad de las muestras; Sample sensitivity Fuente: Base de datos de la Investigación
Elaborado: Los autores


Discusión

De acuerdo a la metodología utilizada, se pudo observar que el adhesivo ortodóntico con dilu-ciones de 125 y 175 ppm puede generar efecto inhibitorio, aunque la eficacia ha sido menor que la clorhexidina, el efecto a largo plazo de las AgNPs podría ser determinante en la inhibición sobre Streptococcus mutans.

Tristán et al.7, en su estudio “Future impact of nanotechnology on medicine and dentistry” manifiestan que cada vez existen más aplicaciones concretas como la de las nanopartículas de plata en la medicina y la odontología, se utilizan como una alternativa más segura para empastes dentales ya que poseen propiedades antidesgaste, antifúngicas y antibacterianas. Para Cardoso8 existe un número creciente de informes sobre la actividad bactericida de Ag-NPs y sobre su actividad contra biofilms bacterianos.

La eficacia de AgNPs sobre S. mutans ya ha sido demostrada, en un estudio similar Murga et al1 evaluaron in vitro la eficacia antimicrobiana de las nanopartículas al incorporarlas al adhesivo colocado en el esmalte dental adyacente a la aparatología ortodóncica fija (brackets) en 40 premolares inoculados con Streptococcus mutans para hacer conteo de unidades formadoras de colonias encontrando que al día 15 una disminución de la presencia de Streptococcus mutans en las muestras.

Según Krzyściak et al.2 las nanopartículas de plata (Nps Ag), tienen alta eficacia contra biofilms debido a que pueden atacar múltiples sitios dentro de la célula en una concentración muy baja (0,5 - 1,0%) para prevenir el crecimiento bacteriano. En el presente estudio se encontró eficacia inhibitoria sobre una cepa específica, los datos deberían confirmarse en nuevos estudios que testen otras concentraciones y el efecto antibacteriano a largo plazo.

Gómez9 analizó el efecto antimicrobiano de estas NPsAg sobre bacterias Gram (-) (Pseudomonas aeruginosa) y bacterias Gram (+) (Staphylococcus aureus), sus resultados permiten concluir que las NPsAg poseen una alta capacidad bactericida, ya que se produce una mortandad del 99,9% con sólo pequeñas dosis de las mismas. Además, se preparó sustratos de Ti/TiO2 modificados con NPsAg, que demostraron ser eficaces para inhibir la formación de biofilms de ambas bacterias (Pseudomona aeruginosa y Staphylococcus aureus); destacando la impor-tancia de los resultados de este trabajo en relación a los materiales implantables de titanio.

Nuestros resultados coinciden con estudios previos que presentan un efecto inhibitorio sobre Streptococcus mutans, siendo estas concentraciones menores a los que expresan Padovani et al.2, en su análisis. Por lo cual se comprueba la hipótesis de investigación: Existe actividad antimicrobiana las nanopartículas de plata a diferentes concentraciones sobre el Streptococcus mutans en sistemas adhesivos ortodónticos con diferencia significativa respecto a la clorhexidina al 0.12%.

Castaneda et al.6 manifiesta que la investigación en el campo de nanomateriales dentales ha permitido nuevos avances en la nanotecnología orientada a preservar y mejorar la salud dental. En este sentido, Cardoso19 indica que existe un número creciente de informes sobre la actividad bactericida de AgNPs y sobre su actividad contra biofilms bacterianos y Padovani et al.12 refiere que existe baja probabilidad de desarrollar resistencias bacterianas y que la alta eficacia contra biofilms se debe a que pueden atacar múltiples sitios dentro de la célula en una concen-tración muy baja (0,5 - 1,0%). Flores20 analizó el efecto antimicrobiano de AgNPs sobre Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus, los resultados comprobaron la alta capacidad bactericida, al producir una mortandad del 99,9% con sólo pequeñas dosis de nanopartículas.

Los resultados obtenidos en esta investigación evidencian que existe coincidencia con los planteamientos antes referidos, al observar que existe efecto inhibitorio sobre Streptococcus mutans, no obstante, que las concentraciones de AgNPs son menores a las que estudió Padovani et al.7. Se comprueba la hipótesis de investigación: Existe actividad antimicrobiana las AgNPs a diferentes concentraciones sobre el Streptococcus mutans en sistemas adhesivos ortodónticos con diferencia significativa respecto a la clorhexidina al 0.12%. Sin embargo, nuevos estudios deberán demostrar la eficacia a largo plazo y evaluar los adhesivos para garantizar que no se alterarían sus propiedades.

 

Conclusiones

Las nanopartículas de plata con tamaño inferior a 100 nm, incluidas a 125 y 175 ppm en adhesivos de ortodoncia poseen actividad antimicrobiana sobre Streptococcus mutans, sin embargo, en el tiempo de estudio no alcanzan la sensibilidad de la clorhexidina al 0.12%.




Bibliografía

  1. M, Arredondo R, Cárdenas MJ, Gutiérrez FJ. Eficacia antimicrobiana del primer ortodóncico adicionado con nanopartículas de plata. Estudio transversal in vitro. Invest. clín [Internet]. 2016 [citado 2019 Ene 15]; 57(4): 321 -329. ISSN 0535-5133. Disponible en: http://ve.scielo.org/scielo.php?pid=S0535-51332016000400002&script=sci_abstract&tlng=es
  2. Krzyściak W, Jurczak A, Kościelniak D, Bystrowska B; Skalniak A. The virulence of Streptococcus mutans and the ability to form biofilms. Eur J Clin Microbiol Infect Dis [Internet]. 2014 [citado 2019 Jan 17]; 33: 499. DOI: https://doi.org/10.1007/s10096-013-1993-7 Disponible en: https://link.springer.com/article/10.1007/s10096-013-1993-7
  3. Rojas S, Echeverría S. Caries temprana de infancia: ¿enfermedad infecciosa. Revista Médica Clínica Las Condes [Internet]. 2014 [citado 2019 Ene 15]; 25(3): 81-587. DOI: https://doi.org/10.1016/S0716-8640(14)70073-2Get rights and content. Disponible en https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0716864014700732
  4. Vargas J, Vargas del Valle P, Palomino. Lesiones de mancha blanca en Ortodoncia. Conceptos actuales. Av Odontoestomatol [Internet]. 2016 [citado 2019 Jul 25]; 32(4): 215-221. ISSN 2340-3152. ISSN 1435-4373. Disponible en: http://scielo.isciii.es/pdf/odonto/v32n4/original4.pdf
  5. Ramírez P, Saldarriaga A, Castellanos L, Roldan S, Álvarez G. Prevalencia de manchas blancas antes y después del tratamiento de ortodoncia. CES Odontología [Internet]. 2014 [citado 2019 Sep 18]; 27(2): 61-67. ISNN 0120-971X. Disponible en: http://revistas.ces.edu.co/index.php/odontologia/article/view/3242/2270
  6. Castaneda IE; Lok A; Lok JM. Prevalencia y factores pronósticos de caries dental en la población de 15 a 19 años. Rev Cubana de Estomatol [Internet]. 2015 [citado 2019 Jul 25]; 52(1): 21-29. ISSN 1561-297X. Disponible en: <http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-5072015000500004&lng=es&nrm=iso>. accedido en 27 sept. 2019.
  7. Tristán JD, SánchezW, Cárdenas J, González AM, Gutiérrez FJ, Murga H. Evaluación de carga bacteriana en brackets metálicos versus brackets cerámicos. Revista Mexicana de Ortodoncia [Internet]. 2015 [citado 2019 Feb 12]; 3(4): 228-231. DOI: https://doi.org/10.1016/j.rmo.2016.03.059. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S239592151600060X
  8. Meneses LL, Rojas JF, Rosero CA, Cepeda De Romero B. Eficacia del protocolo correctivo del índice de placa ortodóntico opi en pacientes con aparatología ortodóntica fija. Revista ODONTOS [Internet]. 2017 [citado 2019 Sep 29]; 48(1): 21-28. ISSN 0123-7810
  9. Gómez M. Nanomateriales, nanopartículas y síntesis verde. REPERT MED CIR. [Internet]. 2018 [citado 2019 Feb 25]; 27(2):75-80. DOI: https://doi.org/10.31260/RepertMedCir.v27.n2.2018.191. Disponible en: https://www.fucsalud.edu.co/sites/default/files/2018-08/Art-1.pdf
  10. Molina GF, Palma S. Nanotecnología en Odontología: Aspectos generales y posibles aplicaciones [Internet]. 2018 [citado 2019 Sep 25]; ;3(3):59-66. DOI: 10.22529/me.2018.3(3)03. Disponible en: https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=6559963
  11. Vázquez R, Huerta A. Nanomateriales con actividad microbicida: una alternativa al uso de antibióticos. Mundo Nano [Internet]. 2014 [citado 2019 Feb 18]; 7(13): 37-46. Disponible en: http://www.revistas.unam.mx/index.php/nano/article/download/48707/43757
  12. Padovani GC, Feitosa VP, Sauro S, Tay FR, Durán G, Paula AJ, Durán N. Advances in Dental Materials through Nanotechnology: Facts, Perspectives and Toxicological Aspects. Trends in Biotechnology [Internet]. 2015 [citado 2019 Feb 20]; 33(11): 621-636. DOI https://doi.org/10.1016/j.tibtech.2015.09.005. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0167779915001912
  13. Coutiño EM, Lagunes A, Arroyo O. Las nanopartículas de plata: mecanismos de entrada, toxicidad y estrés oxidativo. REB [Internet]. 2017 [citado 2019 Oct 3]; 36(2):39-54. Disponi-ble en: https://www.medigraphic.com/pdfs/revedubio/reb-2017/reb172b.pdf
  14. Castro UD, Flores MG, García J, Alavez SL. Esterilización con nanotecnología en Odontología. Odontología Vital [Internet]. 2016 [citado 2019 Oct 3]; n.25: 9-16. Disponible en: <http://www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1659-07752016000200009&lng=en&nrm=iso>. ISSN 1659-0775.
  15. Blandón L, Vázquez MV, Boannini E, Ballarin B. Síntesis electroquímica de nanopartículas de plata en presencia de un surfactante neutro. Rev AFINIDAD LXXII, [Internet]. 2015 [citado 2019 Sep 25]; 569(1): 48-52. Disponible en: https://www.raco.cat/index.php/afinidad/article/viewFile/291709/380209
  16. Vergara A, Toledo E. Acción Bactericida de Nanopartículas de Plata Utilizando extractos de Aloe Vera, para una posterior Aplicación en vendajes y parches. Revista de Simulación y Laboratorio [Internet]. 2017 [citado 2019 Oct 3]; 4(11): 53-58. Disponible en: https://www.ecorfan.org/bolivia/researchjournals/Simulacion_y_Laboratorio/vol4num11/Revista_de_Simulacion_y_Laboratorio_V4_N11_7.pdf
  17. Gallo JP, Ossa CP. Fabricación y caracterización de nanopartículas de plata con potencial uso en el tratamiento del cáncer de piel. Rev. Ingeniería y desarrollo. [Internet]. 2019 [citado 2019 Oct 3]; 37(1): 88-104. ISSN: 2145-9371 (on line). DOI: http://dx.doi.org/10.14482/inde.37.1.6201. Disponible en: http://rcientificas.uninorte.edu.co/index.php/ingenieria/issue/view/495/showToc
  18. Negroni M. Microbiología Estomatológica. 3ra. ed. Buenos Aires: Médica Panamericana; 2018. Disponible en: http://www.amolca.com/publicaciones/periodontologia-clinica-de-carranza-onceava-edicion/ (último acceso 01/03/2019)
  19. Cardoso PC. Nano partículas de plata: obtención, utilización como antimicrobiano e impacto en el área de la salud. Rev. Hosp. Niños [Internet]. 2016. [Citado 2019 Feb 12]; 58(260):19-28. Disponible en: http://revistapediatria.com.ar/wp-content/uploads/2016/04/260-Nanoparti%CC%81culas-de-plata.pdf
  20. Flores CY. Nanopartículas de plata con potenciales aplicaciones en materiales implanta-bles: síntesis, caracterización fisicoquímica y actividad bactericida. Tesis doctoral. Universidad Nacional de La Plata. [Internet] 2014. [Citado 2019 Feb 12]. Disponible en http://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/34946
Luis Martin Guevara Ruiz; https://orcid.org/0000-0002-7958-6918
Pablo Bonilla; https://orcid.org/0000-0003-13711920
María Fernanda Caicedo Breedy; https://orcid.org/0000-0002-3118-1196

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