Producción y caracterización de Anticuerpos Monoclonales específicos para la Toxina del Vibrio cholerae 01. Informe preliminar
Resumen
El Vibrio cholerae es el agente causal de la enfermedad del Cólera. El serotipo 01 puede ser subdividido en los biotipos El Tor y Clásico. En el diagnóstico de la enfermedad del Cólera se utilizan kits comerciales con el uso de Anticuerpos Monoclonales (AM), éstos existen a nivel mundial, pero el país no cuenta todavía con un centro de elaboración y mantenimiento de producción deAM, por lo que se propuso la creación de un Centro de Elaboración de Anticuerpos Monoclonales. En este informé preliminar mencionamos la producción y caracterización deAM contra la toxina colérica (TC) para lo que se utilizó como antígeno el extracto total del V. cholerae 01 (AC). La purificación se realizó mediante cromatografía de afinidad usando Proteína A-Sefarosa. Los AM se caracterizaron por la prueba inmunoenzimática de ELISA usando la Toxina del Cólera de procedencia comercial (TCc) y bacteria sonicada como antígenos. El isotipo del AM obtenido se realizó mediante inmunodifusión doble. La especificidad se determinó mediante inmunotransferencia utilizando como soporte antigénico bacterias enteropatógenas más frecuentes en nuestro medio. Un total de 368 hibridomas se obtuvieron de los cuales 10 mostraron producción
de AM. Los hibridomas de mayor producción fueron F53A9, F53F8, F57A5, F57F10, F59A1, F510F6, F510G5 y F56F11. Seleccionándose, finalmente, el hibridoma
F56F11 por presentar el título más alto, correspondiendo al isotipo lgG3. No observamos reacción cruzada del AM obtenido con las demás bacterias enteropatógenas investigadas mediante inmunotransferencia.
Estos resultados preliminares sustentan la posibilidad de continuar hasta la obtención del kit comercial en la identificación rápida de esta enfermedad.
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Citas
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